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  • 20132-26
    鞣酸—檸檬酸鈉還原法制備膠體金分散顆粒

    A液(80ml):1%氯化金,lml;雙重蒸餾水,79ml。B液(20m1):1%檸檬酸鈉,4ml;1%單寧酸,0.lml;雙重蒸餾水,15.8ml。25mmol/LK2C03,0.1ml;將上述A液加熱到60℃,然后將B液快速加入到A液中,繼續(xù)攪拌,在極短的時(shí)間內(nèi)加熱到煮沸(大約10min),此時(shí)顏色由黑一藍(lán)一亮紅(近似紅葡萄酒顏色)變化。pH調(diào)到所需要求(根據(jù)所標(biāo)記蛋白質(zhì)種類的不同,所需的pH也不一樣)。上述用量合成的膠體金為10nm,根據(jù)所加入鞣酸(或稱單寧酸)量的不同...

  • 20132-26
    制備膠體金分散顆粒的其他方法

    乙醇—超聲波還原法(Baigent和Muller,1980)(1)取1%AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml雙重蒸餾水。(2)用0.2m01/LK2C03調(diào)pH至7.2,再加入lml無水乙醇。(3)用20KC、135W超聲波探頭浸入溶液內(nèi)進(jìn)行超聲振蕩,此法制備的顆粒為6~10nm。硼氫化鈉還原法(Tschopp等,1982)(1)取0.6ml1%氯化金水溶液,加入40ml預(yù)冷(4℃)雙蒸餾水。(2)再加入0.2mol/LK2C030.2ml。(3)邊攪拌邊加入新鮮配制...

  • 20132-23
    生物實(shí)驗(yàn)室安全

    『安全』是進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)zui重要的考量,若不留意,經(jīng)常會(huì)造成*的遺憾,因此,請(qǐng)遵守以下各項(xiàng)規(guī)定:1.請(qǐng)事先勘查緊急沖洗站、洗眼臺(tái)及滅火器的位置。2.請(qǐng)避免穿著涼鞋或拖鞋(腳趾不要裸露),并請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)衣。留長發(fā)者,在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前將頭發(fā)束好。3.在實(shí)驗(yàn)室請(qǐng)勿吸煙、化妝、嚼口香糖、吃東西、喝飲料。食物不可存放于實(shí)驗(yàn)室的冰箱中。4.實(shí)驗(yàn)前后請(qǐng)將工作區(qū)域清理擦拭干凈,實(shí)驗(yàn)中打翻任何藥品試劑時(shí),要隨時(shí)清理;離開實(shí)驗(yàn)室前請(qǐng)記得洗手。5.使用刻度吸管時(shí),切勿用嘴吸取,請(qǐng)用安全吸球或吸管唧筒。6...

  • 20132-23
    微量移液器之拆解與組裝方法步驟

    微量移液器(micropipet)是進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)或分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的*工具,然而使用方法的正確與否,以及微量移液器的準(zhǔn)確性,都直接影響了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性,故請(qǐng)對(duì)你持有之微量移液器作深入的認(rèn)識(shí)。本實(shí)驗(yàn)室所使用的微量移液器為GilsonPipetmanP系列,包括P1000,P200,P20等。以下使用方法及注意事項(xiàng),部份取材自原廠所附說明書,請(qǐng)?jiān)斪x之后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1)請(qǐng)參照?qǐng)D1.1,認(rèn)識(shí)微量移液器每一部份組件之位置及名稱。2)將D(ejector)取下,C(connectingn...

  • 20132-21
    瓊脂糖膠體電泳 (agarose gel electrophoresis)

    儀器用具:迷你電泳槽及鑄膠器(MupidII);UVtransilluminator及影像分析系統(tǒng);防護(hù)面罩藥品試劑:瓊脂糖粉末(agarose,lowEEO)1×TAE電泳緩沖液(40mMTris-acetate,1mMEDTA,pH8.0):由50×TAE(每1L含242gTrisbase,57.1mLglacialaceticacid,100mL的0.5MEDTA-8.0)稀釋使用。10×追蹤染劑(0.25%bromophenolblue,0.25%xylenecyan...

  • 20132-21
    DNA限制酶分析與切割

    儀器用具:37℃及65℃水浴或恒溫槽藥品試劑:質(zhì)體pBluescriptIISK(-)限制酶:BamHI,PvuII及ScaI(濃度均為10units/μL,Invitrogen)10×Reactionbuffer6(0.5MTris-HCl,pH7.4;60mMMgCl2;0.5MNaCl;0.5MKCl)無菌水方法步驟:1)取7支微量離心管,依下表所列體積(單位μL)依序加于管壁不同位置上。◆每次吸取限制酶時(shí),請(qǐng)換一支新的微量移液器頭以免造成污染。總體積為20μL,短暫離...

  • 20132-19
    Colony hybridization重組質(zhì)體的檢定

    方法步驟:1)前一天轉(zhuǎn)形的培養(yǎng)皿,當(dāng)菌落長至約0.5mm大小時(shí),將培養(yǎng)皿移至4℃放置1h。2)準(zhǔn)備一張無菌的硝化纖維濾膜,以鉛筆在邊緣標(biāo)上組別。◆請(qǐng)戴手套后再拿取濾膜!3)打開培養(yǎng)皿蓋子,以兩支扁平鑷子將濾膜兩邊夾住,輕輕覆蓋在菌落上方,盡可能避免有氣泡產(chǎn)生。◆注意!濾膜覆蓋上去后就不要再移動(dòng)!4)等濾膜*濕透后,以針頭在濾膜邊緣戳洞做記號(hào)(至少做三個(gè)記號(hào))。小心把濾膜掀起,菌落朝上放置在LB/Amp/IPTGplate上。蓋上蓋子,在37℃培養(yǎng)2~4h,以誘導(dǎo)啟動(dòng)T5pro...

  • 20132-19
    Histochemical detection重組質(zhì)體的檢定

    儀器用具:平端鑷子藥品試劑:Nitrocellulose濾膜LB/Amp/IPTG/X-Glucplate(LBplate添加100μg/mLampicillin,0.2MIPTG,50μg/mLX-Gluc)方法步驟:1)前一天進(jìn)行轉(zhuǎn)形的培養(yǎng)皿,當(dāng)菌落長至約0.5mm大小時(shí),將培養(yǎng)皿移至4℃放置至少1h。2)準(zhǔn)備一張無菌的硝化纖維濾膜,以鉛筆在邊緣標(biāo)上組別。◆請(qǐng)戴手套后再拿取濾膜!3)打開培養(yǎng)皿蓋子,以兩支扁平鑷子將濾膜兩邊夾住,輕輕覆蓋在菌落上方,盡可能避免有氣泡產(chǎn)生。◆...

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